Carcinoma escamoso oral de ratón moc1 / moc2 / hembra

Información básica

Nombre de la célula:Carcinoma de células escamosas orales en ratones moc1 / moc2

Línea celular:C57BL/6 Cxcr3-/-

Fuente celular:Países extranjeros

Identificación celular:Se ha aprobado la identificación Str

Morfología celular:Tipo de célula poliédrica linfoblástica, pared adherente + crecimiento suspendido

Medio de cultivo:Dmem (incluido NaHCO3 1,5g / l) (basmed - AW - 013) + FBS 10% + P / s1% 500ml medio de cultivo: imdm: F10 / F12 = 2: 1313 ml: 157ml medio de cultivo + fbs10% (50ml) + 2,5 mg / 500ml insulina + 20ug / 500ml + 2,5 ug / 500ml EGF + P / S 1% doble resistencia, 1%.

Condiciones de cultivo:Fase gaseosa: aire, 95%; Dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 grados centígrados, humedad de la incubadora 70% - 80%

Fondo celular:El cáncer de células escamosas orales (oscc) es un subconjunto destacado del cáncer de cabeza y cuello, que es uno de los seis cánceres más comunes. El principal factor de riesgo para la aparición de oscc es la exposición a carcinógenos, que distingue este subgrupo del cáncer de cabeza y cuello del cáncer de cabeza y cuello inducido por el virus del cáncer humano. A pesar de los avances en pruebas, cirugía, quimioterapia y radioterapia, el pronóstico del oscc se ha mantenido estable durante décadas. Además, en el momento del diagnóstico, aproximadamente dos tercios de los pacientes con oscc padecían una enfermedad localmente avanzada, lo que provocó un aumento de la incidencia y mortalidad.

Uso celular: solo para investigación científica

Precauciones

1. las células moc1 son particularmente activas, la tasa de valor agregado es muy rápida, no se recomienda que la densidad de transmisión sea demasiado grande, sino que se opta por pavimentar un poco más delgado, cuando se alcanza el 80% de transmisión, es difícil de digerir, se recomienda agregar el 0,25% de EDTA para mezclar completamente todas las células expuestas, colocarlas en una incubadora para la digestión, y la duración es de unos 3 - 4 minutos después de sacarlas.

2. batir en el lado del utensilio de cultivo ayuda a que las células se desprendan. el proceso de batir dura unos 2 minutos antes de que la mayoría de las células se desprendan. si la proporción de desprendimiento no es grande, también se puede volver a poner en la incubadora para continuar digiriendo durante 1 - 2 minutos y luego sacarlas de nuevo para batir y desprendirlas. espere a que el 80 - 90% de las células se desprendan antes de terminar la digestión, suspender centralmente y volver a colocar el frasco, disperso uniformemente.

3. las células moc2 no son particularmente sólidas como las células convencionales. El ciclo de duplicación no es tan rápido como moc1. Se trata con métodos digestivos convencionales.

Envío a temperatura ambiente

Después de recibir, las botellas t25 se desinfectan y luego se colocan en la incubadora para Dejar reposar durante 2 - 3 horas, observar la densidad y el estado, tomar fotos de 2 - 3 comentarios a las ventas, y la densidad se puede transmitir de generación en generación. La proporción de transmisión temprana es de 1: 2. cuando se transmita de nuevo después de crecer, se recomienda congelar una de las botellas enteras en un tubo de almacenamiento congelado de 1 ml, y la otra botella continúa transmitiéndose. después de congelar repetidamente 2 - 3, se ampliará para hacer experimentos para evitar que las emergencias causen la interrupción de las semillas.

Envío de hielo secoHay dos congeladores de envío celular convencionales, uno de recuperación y el otro de repuesto. cuando la Primera recuperación no tiene éxito, se recupera estrictamente de acuerdo con los requisitos del fabricante. si la recuperación no tiene éxito, se conservan inmediatamente fotos de recuperación para informarnos.

Células adherentes

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 0,25% (w / v) - 0,53 mm EDTA al frasco de cultivo (t25 1 - 2 ml, T75 2 - 3 ml), colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de Las células se redondean y se desprenden, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones y añadir 3 - 4 ml de medio de cultivo con un 10% de FBS después de golpear ligeramente el frasco para terminar la digestión.

3. mezclar suavemente y aspirar, centrifugar durante 3 - 5 min a 1000 rpm, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. Dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri t25 / 6 cm en una proporción de 1: 2, añadir 6 - 8 ml de un nuevo medio de cultivo configurado de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se realiza en una proporción de 1: 2 a 1: 5 de acuerdo con la situación real.

4. Criopreservación celular: después de recibir la célula, se recomienda congelar un lote de semillas celulares durante las tres primeras generaciones de cultivo para su uso experimental posterior.

5. el medio de cultivo utilizado para el transporte (medio de cultivo de infusión) ya no se puede utilizar para cultivar células, por favor, cambie por un medio de cultivo recién preparado de acuerdo con las condiciones de cultivo celular de las instrucciones para cultivar células.

Células suspendidas

Las células que crecen en suspensión pueden mantener el Estado de crecimiento celular agregando un medio de cultivo al frasco de cultivo. en general, el mantenimiento de la densidad celular en 1 × 10 ⁵ a 1 × 10 ⁶ por ML (diferentes células requieren diferentes densidades) puede mantener el crecimiento normal de las células. Si es necesario dividir el vial, se puede recoger la suspensión celular en un tubo centrífuga de 1000 rpm, centrifugar durante 5 minutos, descartar el sobrenadante, reponer 1 - 2 ml de medio de cultivo y volver a mezclar, y luego dividir la suspensión celular en el nuevo vial t25 en una proporción de 1: 2, añadir 6 - 8 ml de nuevo medio de cultivo configurado de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se lleva a cabo en una proporción de 1: 2 a 1: 4 de acuerdo con la situación real.

Bioseguridad

1. todas las células animales se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en la Plataforma de bioseguridad secundaria. preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados antes de que puedan ser desechados.

2. se recomienda usar siempre guantes protectores, ropa y máscaras protectoras al reanimar las células congeladas. Nota: el congelador Se filtrará cuando se sumerja en nitrógeno líquido y se llenará lentamente de nitrógeno líquido. Al descongelarse, la conversión del nitrógeno líquido en fase gaseosa puede provocar la explosión del recipiente o soplar su tapa con fuerzas peligrosas, produciendo así escombros voladores que causan daños humanos.