Línea celular moc1

Información básica

Nombre de la célula:Línea celular moc1

Matraz t150: 07 - 200 - 64

Matraz t75: 10 - 126 - 37

Refrigerante: 03 - 374 - 059

Filtro 45um: 09 - 754 - 21

Línea espectral inerte: moc1,22

Línea agresiva: moc2

IMDM: sh30228.02 Hams

Mezcla nutritiva F10 - f12: sh30026.01 suero bovino fetal, característico - Hailun

Catálogo / número de lote: sh30071.03 / awk24001

Filtro para filtrar botellas de filtro 1l: 09 - 761 - 108

Número de catálogo de reactivos científicos insulina: i6634 - 50 mg

Número de catálogo de reactivos microporos de emd: factor de crecimiento epidérmico (egf), humano recombinante: 01 - 107

Línea celular moc1

Líneas celulares descongeladas

1. antes de descongelar, añadir 21 ml de medio de cultivo de línea Moc imdm a t150 (si se quiere descongelar en t75, añadir 10 ml a t75)2. retire el nitrógeno líquido del frasco de congelación y rocíe el vial que contiene 70% de alcohol para lavarlo.

3. coloque la mitad inferior del congelador en un baño de agua a 37 grados centígrados (no permita que la tapa entre en contacto con el agua para evitar la contaminación) hasta que haya un pequeño trozo de hielo flotando.

4. rocíe nuevamente el congelador con etoh y póngalo en el capó. Añadir 1 ml de pipeta de medio de cultivo a la célula de 1 ML y estos 2 ML a la t150 que ya contiene el medio de cultivo (de modo que un t150 tiene un total de 22 ml).

5. tome algunos medios de cultivo del matraz t150, enjuague el congelador y colócalo plano para asegurarse de que todas las células residuales permanezcan en el congelador.

Línea celular congelada
1. recogida de células de t150

2. girar en partículas en un tubo cónico de 15 ML (1000 RPM x 5 minutos)

3. expulsar el líquido sobrenadante

4. haga clic en el tubo cónico de 15 ML para suspender las células

5. añadir 1,5 ml de medio de cultivo de la línea Moc imdm para reconstruir las células en el medio de cultivo - mantener el hielo

6. añadir lentamente 1,5 ml de medio congelado al entrar en el hielo (hacer medio congelado - 20% Dmso en el medio de línea imdm moc). Ejemplo: inventario de 20ml - añadir 16ml de medio de cultivo de línea Moc imdm y 4ml dmso. Filtro de jeringa, con filtro um

7. de 1 ML a 3 viales congelados cada uno

8. no conservar más de 2 semanas a - 80 grados centígrados

9. añadir una solución de nitrógeno líquido en 1 - 2 semanas

Nota:Si es necesario, se puede agregar a 2 ml de imdm y 2 ml de medio de congelación para almacenarlo en 4 viales. Además, es mejor contar las células antes de congelarlas y registrarlas en el vial.