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Kit de detección cuantitativa de IL - 6 porcino
Fecha:2012-07-26Leer:0

Solo para investigación científica, no debe usarse para diagnóstico médico.

Lea cuidadosamente este prospecto antes de usarlo.

usar El camino: Para la detección cuantitativa de muestras de suero porcino, plasma y líquidos relacionadosIl6(IL-6)Contenido.

Principio de funcionamiento

Este Kit utiliza el método de inmunoabsorción enzimática sandwich de doble sitio..ELISA), determinación en muestrasIl porcina6(IL-6)Nivel. PrepagoIl porcina6(IL-6)Se añade al agujero marcado por la enzima del anticuerpoProductos estándar, muestras a probar yHRPMarcadoIl6(IL-6)Anticuerpos, incubados y lavados para eliminar los componentes no Unidos antes de agregar el sustratoA,B, produciendo azul,Y se convierte en el amarillo final de Zui bajo la acción del ácido.La oscuridad del color y la muestraIl porcina6(IL-6)ConcentraciónCorrelación positiva.

Composición del kit

1

Productos estándar..2000 pg / ml(...)

0,5 ml

7

Agente de colorAlíquido

6ml

2

Diluyente estándar

6ml

8

Agente de colorBlíquido

6ml

3

Placa de cubierta de etiqueta enzimática

12Agujero×8barra

9

Líquido de terminación

6ml

4

Reactivos estándar enzimáticos

6ml

10

Manual de instrucciones

1Copias

5

20× detergente concentrado

25ml

11

Película de sellado

2Zhang

6

Diluyente de muestra

6ml

12

Bolsa sellada

1un

Nota: la dilución estándar para los productos estándar se diluye a su vez de la siguiente manera:20001000500250125,0 pg/ml

Reactivos y equipos necesarios pero no proporcionados

1.37Incubadora.

2.Medidor estándar de enzima de especificación estándar.

3.Pipeta de precisión y cabeza de succión desechable

4.Agua destilada,

5.Tubo de ensayo desechable

6.Papel absorbente de agua

Precauciones

1.desde2 - 8El kit extraído a ° C debe equilibrarse al menos a temperatura ambiente antes de abrir el kit.30Min.Si el paquete estándar enzimático no se agota después de la apertura de la placa, la placa debe conservarse en una bolsa sellada.

2.El muestreador debe utilizarse en cada paso y su precisión debe corregirse con frecuencia para evitar errores de prueba.

3.Se recomienda que todos los estándares y muestras se sometan a pruebas dobles.

4.Siga estrictamente el funcionamiento de las instrucciones, y los resultados de la prueba deben basarse en la lectura del medidor de enzima..

5.Para evitar la contaminación cruzada, evite reutilizar la cabeza de succión yPelícula de sellado.

6.Otros reactivos no utilizados deben empaquetarse o cubrirse. No mezcle los reactivos con diferentes números de lote. Uso antes de la fecha de caducidad.

7.SustratoBSensible a la luz y evite la exposición a la luz durante mucho tiempo.

Método de lavado de placas

Método de lavado manual de la placa: deshacerse del líquido en la placa estándar de la enzima; Coloque varias capas de papel absorbente de agua en la plataforma experimental y golpee con fuerza hacia abajo varias veces; Diluir el detergente diluido al menos0,35 mlEn el agujero de inyección, remojo1 - 2Min. Este proceso se repite varias veces según sea necesario.

Lavado automático de placas: si hay un lavado automático de placas, debe usarse hábilmente antes de pasar al proceso experimental formal.

Requisitos para especímenes

1.No se puede detectarNaN3Muestras, debidoNaN3Inhibición de la peroxidasa de rábano picante..HRP) actividad.

2.La extracción de los especímenes se realiza lo antes posible después de la recolección, la extracción se realiza de acuerdo con la literatura relevante, y el experimento debe llevarse a cabo lo antes posible después de la extracción. Si no se puede realizar la prueba de inmediato, se puedeColocar el espécimen en-20Conservar a ℃, pero se debe evitar la congelación y descongelación repetidas

Procedimientos operativos

1.Se establecen agujeros en blanco (los agujeros de control en blanco no agregan muestras y reactivos estándar enzimáticos, y el resto de los pasos son los mismos), agujeros estándar y agujeros de muestra a medir. Añadir productos estándar en el agujero estándar en la placa de cubierta del paquete estándar de la enzima50 μl; añadir diluyente de muestra en el agujero de la muestra a medir en la placa de cubierta del paquete enzimático40 μlY luego agregue la muestra a medir10 μl(la dilución final de la muestra Zui es5Veces). Añadir reactivos estándar enzimáticos a cada agujero50 μlExcepto los agujeros en blanco. Agitar suavemente y mezclar bien,37℃ educación cálida60Min.

2.Desechar el líquido, secarlo, rellenar cada agujero con detergente diluido, oscilar30En segundos, retire el detergente y seque con papel absorbente. Así se repite5Dos veces, palmaditas secas.

3.Añadir un agente de color primero a cada agujeroA50μl, y luego agregue el agente de colorB50μl, agitar suavemente y mezclar bien,37Grados Celsius para evitar la luz y mostrar color15minuto.

4.Retire la placa estándar de la enzima y agregue el líquido de terminación a cada agujero.50 μl, detener la reacción (en este momento el azul se pone de pie y se vuelve amarillo).

5.Determinación: ajustar a cero con agujeros en blanco, en450 nmMedir el valor de absorción de cada agujero a la longitud de onda..ODValor). La determinación debe hacerse después de agregar el líquido de terminación.15Se llevará a cabo en menos de minutos.

6.De acuerdo con la concentración del producto estándar y la correspondienteODValor para calcular la ecuación de regresión lineal de la curva estándar, y luego de acuerdo con la muestraODEl valor calcula la concentración de la muestra correspondiente en la ecuación de regresión. También se pueden calcular utilizando varias aplicaciones. Hay que tener en cuenta que debido a la dilución de la muestra, su concentración real debe multiplicarse por el múltiplo de dilución total.

Resumen de los procedimientos operativos:

Preparación de reactivos, muestras y productos estándar

Añadir las muestras preparadas, los estándares y los reactivos estándar enzimáticos,37Reacción en grados Celsius60minuto

Lavado de placas5Segunda vez, agregue la solución de colorA,B37℃ color15minuto

Añadir líquido de terminación

15Leer en minutosODvalor

Cálculo

Alcance de la prueba:31.2pg/ml -2000pg/ml.

Especificaciones: 96T/caja

Guardar: 2 - 8

Período de validez: 6Meses..2 - 8℃)。