Método de uso del kit de detección de ácidos nucleicos para la investigación científica (oc43 / hku1):

La sensibilidad del método de determinación proviene de la enzima como informe. La enzima es un catalizador orgánico, una pequeña cantidad de enzima puede inducir una gran cantidad de reacciones catalíticas, produciendo un fenómeno de reacción de color observable. Por lo tanto, el sistema a menudo se llama sistema de amplificación enzimática.

1. dilución del estándar: este Kit proporciona un estándar original, y el usuario puede diluirlo en un tubo de ensayo pequeño de acuerdo con el siguiente gráfico. 24 μg / ml de la norma original de 150 μl de la norma 5 se añade 150 μl de dilución de la norma

12 μg / ml de la norma 4 150 μl de la norma 5 se añade 150 μl de dilución de la norma

6 μg / ml de la norma 3 150 μl de la norma 4 se añade 150 μl de dilución de la norma

La norma 3 de 150 μl de la norma 2 de 3 μg / ML se añade a la dilución de 150 μl de la norma.

1,5 μg / ml de la norma 1 150 μl de la norma 2 se añade 150 μl de dilución de la norma

2. adición de muestras: se establecen agujeros en blanco, agujeros estándar y agujeros de muestra a medir, respectivamente. Añadir con precisión 50 μl de muestra al estándar en la placa de cubierta del paquete estándar enzimático, primero añadir 40 μl de dilución de muestra al agujero de la muestra a medir, y luego agregar 10 μl de muestra a medir (la dilución final de la muestra es 5 veces). Añadir la muestra a la parte inferior del agujero de la placa estándar de la enzima, tratar de no tocar la pared del agujero, sacudir suavemente y mezclar bien. - sí.

3. educación caliente: sellar la placa con película de sellado y colocarla a 37 ° C durante 30 minutos.

4. dispensación: diluir 30 veces el detergente concentrado con agua destilada 30 veces y reservarlo

5. lavado: quitar cuidadosamente la película de sellado, descartar el líquido, secar, llenar cada agujero con líquido de lavado, Dejar reposar durante 30 segundos y descartarlo, repetirlo 5 veces, palmaditas secas.

6. adición de enzima: añadir 50 μl de reactivo estándar de enzima a cada agujero, excepto el agujero en blanco.

7. Wen yu: la operación es la misma 3.

8. lavado: operación 5.

9. color: primero agregue el agente de color A50 μl por agujero, luego agregue el agente de color b50 μl, agite suavemente y mezcle bien, evite la luz y el color a 37 ° C durante 15 minutos.

10. terminación: 50 μl de líquido de terminación por agujero para detener la reacción (en este momento, el azul se convierte en amarillo).

11. determinación: la absorción (valor de od) de cada agujero se mide secuencialmente con una longitud de onda de 450 nm de aire acondicionado en blanco cero. La determinación debe realizarse dentro de los 15 minutos posteriores a la adición del líquido de terminación.