Células epiteliales tubulares humanas

Células epiteliales tubulares humanas

Atributos básicos de la célula:

Perfil de la célula:Células epiteliales tubulares humanasSeparar el tejido de la tráquea; Trachea, parte de los órganos respiratorios; Es un tubo cilíndrico con una pared trasera ligeramente plana. El extremo superior es plano en el borde inferior de la sexta columna cervical y está conectado con el cartílago circular; Hacia abajo hasta la Unión del cuarto y quinto Cuerpo vertebral torácico (equivalente al plano angular del esternón), se divide en los bronquios principales izquierdo y derecho, y la bifurcación se llama bifurcación traqueal. La tráquea está compuesta principalmente por 14 - 16 cartílagos semicirculares, elásticos, cartílagos en forma de "c", con brechas hacia atrás, cada anillo cartílagos Unido por ligamentos, y la brecha detrás del anillo está conectada por un Músculo liso y un tejido conjuntivo denso, manteniendo un Estado de apertura continua. El Lumen está forrado con mucosa, la superficie cubre el epitelio ciliado, el moco Secretado por la mucosa puede adherirse a las partículas de polvo inhaladas en el aire, y los cilios se balancean constantemente hacia la faringe para expulsar el moco y el polvo para purificar el gas inhalado. El epitelio traqueal es la primera línea de defensa para que las vías respiratorias entren en contacto con el entorno externo, no solo las células Diana que actúan como diversos patógenos y mediadores inflamatorios, sino también como células efectoras para sintetizar y liberar una variedad de mediadores inflamatorios y citocinas, participando así en la inflamación de las vías aéreas y la respuesta inmune. Las células epiteliales traqueales primarias cultivadas in vitro son extremadamente importantes en la investigación básica y clínica debido a sus grandes similitudes con los tejidos in vivo en términos de estructura morfológica y actividad funcional.

Condición del sobre: colágeno de cola de rata I (2 - 5 μg / cm2)

Medios de cultivo: contiene fbs, aditivos para el crecimiento, pencilina, streptomicina, etc.

Frecuencia de cambio de líquido: cambio de líquido cada 2 - 3 días

Líquido digestivo: 0,25%

Condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire, 95%; CO2，5%

Métodos de cultivo celular primario:

1. preparación: coloque todo tipo de productos de cultivo desinfectados en la Mesa de purificación y desinfecte con rayos ultravioleta durante 20 minutos. Lávese las manos y limpie las manos hasta el codo con un 75% de alcohol antes de comenzar el Trabajo.

2. diseño: encienda la lámpara de alcohol e instale el sombrero de la pajita.

3. tratamiento del tejido: coloque el bloque de tejido en un vaso de precipitados, Enjuague con solución Hanks de 2 a 3 veces y elimine la contaminación sanguínea; Si se sospecha que el tejido puede contaminarse, se puede colocar primero en una mezcla que contenga verde durante 30 a 60 minutos.

4. corte: cortar el tejido en bloques de 2 a 3 mm con tijeras oftalmológicas para facilitar la digestión. Añadir entre 30 y 50 veces más líquido que el total de bloques de tejido, y luego verterlo en un matraz triangular juntos, ligar la boca del matraz o taparlo con un tapón de goma.

5. digestión: se puede digerir en baño de agua a temperatura constante o en una incubadora de 37 ° c. la digestión debe sacudirse cada 20 minutos, como es mejor digerir con una batidora de temperatura constante electromagnética. El tiempo de digestión depende del tamaño del bloque tisular y la dureza del tejido.

6. separación: cuando se ve turbidez en el líquido digestivo durante la digestión, se puede aspirar un poco de líquido digestivo con una pajita para observar bajo el microscopio, si el tejido se ha dispersado en grupos celulares o células individuales, se termina inmediatamente la digestión y luego se filtran los bloques de tejido que aún no se han digerido completamente a través de Un tamiz adecuado de acero inoxidable. Centrifugar el líquido digestivo a baja velocidad (500 a 1000 rpm) durante 5 minutos, aspirar el suero superior y agregar una cantidad adecuada de medio de cultivo que contiene suero.

7. conteo: contar con una placa de conteo, como la densidad celular de la suspensión celular es demasiado grande, y después de complementar el medio de cultivo y ajustarlo, se carga en el frasco de cultivo. Para la mayoría de las células, el pH requiere un rango de 7,2 a 7,4, y el medio de cultivo es ligeramente rojo, como el color amarillo, lo que indica que el líquido se vuelve ácido y se puede ajustar con nahco3.

8. cultivo: cultivo en una incubadora de 36,5 ° c, si se cultiva con una incubadora de co2, la tapa de la botella debe aflojarse durante medio círculo.

Precauciones:

1. el cultivo se puede conservar durante 3 - 6 meses a 4 ° c.

2. durante el cultivo celular, preste atención a mantener la operación estéril.

3. durante el cultivo de paso, el tiempo de digestión no debe ser demasiado largo, de lo contrario afectará la adherencia celular a la pared y su estado de crecimiento.

4. se recomienda que el cliente tome varias fotos de la célula en cada múltiplo los primeros tres días después de recibir la célula para registrar el Estado de la célula, lo que facilita la armonía.

Comunicación del Departamento técnico; Debido al transporte, las células sensibles individuales experimentarán inestabilidad, por favor póngase en contacto con nosotros a tiempo para informarnos detalladamente de la situación específica de las células, para que nuestros técnicos puedan rastrear, visitar de nuevo hasta que se resuelva el problema.

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