Células madre mesenquimales del cordón umbilical canino

Células madre mesenquimales del cordón umbilical canino

- sí.Atributos del producto:

- sí.Introducción celular:

El tronco mesenquimal del cordón umbilical canino se separó del cordón umbilical; El cordón umbilical es una estructura tubular de mamíferos que conecta el feto con la placenta. Originalmente, se formó por una membrana amniótica envuelta en una cápsula de yema de huevo y una extensión en forma de mango de la membrana urinario. Los vasos sanguíneos que pasan por la membrana urinario en el cordón umbilical son la arteria umbilical y la vena umbilical, y los vasos sanguíneos de la cápsula de yema de huevo son la arteria mesentérica umbilical y la vena mesentérica umbilical. Cuando el saco de Yema y sus vasos sanguíneos se degradan, la arteria umbilical y la vena umbilical se desarrollan, y en estos huecos se puede ver un mesenquima gelatinoso suelto. En el útero, los capilares que salen de la arteria uterina en la parte materna de la placenta, cerca de los capilares fetales de la parte embrionaria de la placenta, donde se realiza entre la sangre materna y fetal.CO2yO2El intercambio de metabolitos, es decir, residuos metabólicos y nutrientes. La arteria umbilical transporta los residuos del feto a la placenta, y la vena umbilicalO2Y nutrientes transportados desde la placenta al feto. Después, las venas uterinas transportan los residuos metabólicos del feto, y ciertas hormonas y anticuerpos también se transfieren de la madre al feto a través del cordón umbilical. El cordón umbilical contiene una gran cantidad de células madre, que son las semillas de la vida y se diferencian en varias células del cuerpo, dando varios frutos diferentes: células sanguíneas, células nerviosas, células óseas, etc. Las células madre son grupos celulares con potencial de autorrenovación, alta proliferación y diferenciación múltiple; Estas células pueden mantener las características y cantidades de sus propias células a través de la división, y pueden diferenciarse aún más en diversas células tisulares, desempeñando así un papel activo en la reparación de tejidos, etc. Células madre mesenquimalesMSC) es una célula madre con un alto potencial de autorrenovación y diferenciación multidireccional. Bajo diferentes condiciones de inducción, se puede diferenciar en células de tejido distintas de una variedad de células hematopoyéticas y tiene los efectos de apoyo hematopoyético, inmunomodulación y reparación de tejidos; En la actualidad, se utiliza principalmente para el tratamiento de enfermedades inmunológicas reumáticas. Células madre mesenquimalesMSC) es una célula madre adulta con potencial de autorrenovación y diferenciación multidireccional, que se encuentra en la médula ósea, el tejido adiposo, la sangre del cordón umbilical y una variedad de tejidos fetales. Puede secretar una variedad de citocinas y factores de crecimiento, promoviendo células madre hematopoyéticas..HSC) proliferación y diferenciación.MSCTambién tiene efectos inmunomoduladores, antiinflamatorios y reparadores de tejidos que reducen la enfermedad de injerto contra huésped..GVHD) y otras complicaciones relacionadas con el trasplante.

- sí.Introducción al método:

El tronco mesenquimal del cordón umbilical canino aislado en el laboratorio se preparó mediante el método de pegado de tejido, y el número total de células fue de aproximadamente5×10¿⁵ sí?células/Botella.

- sí.Pruebas de calidad:

Meridiano mesenquimal del cordón umbilical canino aislado de laboratorioCD90Identificación por inmunofluorescencia, con una pureza alcanzable90%Lo anterior y no contieneEl VIH-1,VHB,VHC, micoplasma, bacterias, levadura y hongos, etc.

- sí.Información de formación:

Medios de cultivo: incluyendoFBS,FEG,bFGF,penicilina,estreptomicinaesperar

Frecuencia de cambio de líquido: cada2 - 3Cambiar el líquido una vez al día

Características de crecimiento: pegado a la pared

Morfología celular: tipo de Fibroblasto

Características de la transmisión: transmisibles3 - 5Alrededor de la generación

Líquido digestivo:0,25%

Condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire,95%V;CO2，5%

El ciclo de cultivo in vitro del tronco mesenquimal del cordón umbilical canino es limitado; Se recomienda utilizar medios de crecimiento especiales de apoyo y métodos de operación correctos para el cultivo para garantizar un buen estado de cultivo de la célula.

Operaciones de cultivo celular:

1) células de reanimación:El criodepósito que contiene suspensión celular se sacude rápidamente y se descongela en un baño de agua a 37 ° c, y se mezcla uniformemente con un medio de cultivo de 4 ML. Centrifugar durante 4 minutos a 1000 rpm, descartar el líquido sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplar bien. A continuación, se añaden todas las suspensiones celulares al frasco de cultivo durante la noche (o se añade la suspensión celular a una placa de Petri de 10 cm, se añaden unos 8 ml del medio de cultivo y se cultiva durante la noche). Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2) transmisión celular:Si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de paso.

1. abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

2. añadir 1 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) en el frasco de cultivo, colocarlo en una incubadora a 37 ° C para digerir durante 1 - 2 minutos, y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si la mayoría de las células se redondean y se caen, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el frasco de cultivo y añadir una pequeña cantidad de medio de cultivo para terminar la digestión.

3. presione 6 - 8 ml / botella para complementar el medio de cultivo, revuelva suavemente y exprima, centrifuga durante 4 minutos en condiciones de 1000rpm, abandone el sobrenadante, agregue 1 - 2ml de medio de cultivo y sople bien.

4. dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2.

3) Criopreservación celular:Cuando la célula está en buen estado de crecimiento, se puede congelar la célula. Las siguientes botellas t25 son de la categoría;

1. al congelar la célula, después de descartar el medio de cultivo, se añade 1 ML después de limpiar el pbs, y después de que la célula se redondea y se cae, se añade 1 ml del medio de cultivo que contiene suero para terminar la digestión, que se puede contar con una placa de recuento de sangre.

2. eliminar el sobrenadante por centrifugación de 1000 RPM en 4 minutos. Añadir 1 ml de células de suspensión de suero, añadir suero y Dmso de acuerdo con el número de células, mezclar suavemente, la concentración final de Dmso es del 10%, la densidad celular no es inferior a 1x106 / ml, congelar 1 ml de suspensión celular en cada liofilizador, prestar atención al liofilizado para hacer un buen trabajo de identificación.

3. coloque el criodepósito en la Caja de enfriamiento del programa, Póngalo en el refrigerador de - 80 grados y pase al almacenamiento de nitrógeno líquido después de 2 horas. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez.
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CD48ReorganizadorCD48 / SLAMF2 / BCM1Proteína(FcetiquetaProteína

IL17RA Proteína humanaReorganizadorIL17RA / CD217Proteína

Proteína HA H12N5Gripe a recombinanteH12N5 (A/teal de alas verdes/ALB/199/1991)Hemaglutinina(Hemaglutinina / HA)Proteína

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CD48ReorganizadorCD48 / SLAMF2 / BCM1Proteína(FcetiquetaProteína

| precauciones:

1. después de recibir las células nucleares no rojas de la sangre, primero observe si el vial celular está intacto, si el medio de cultivo tiene fugas, turbidez y otros fenómenos, si hay los fenómenos anteriores, Póngase en contacto con nosotros a tiempo.

2. lea cuidadosamente las instrucciones de la célula para comprender la información relacionada con la célula, como la morfología celular, el medio de cultivo utilizado, la proporción de suero, las citocinas necesarias, etc., para garantizar las condiciones de cultivo celular *. Si hay un problema con la célula debido a las malas condiciones de cultivo *, la responsabilidad recae en el cliente.

3. limpie la superficie del vial celular con un 75% de alcohol y observe el Estado celular bajo un microscopio. Debido a problemas de transporte, una pequeña cantidad de células adheridas a la pared se caerán de la pared del frasco, las células se colocarán en una caja de cultivo y se cultivarán estáticamente durante 4 a 6 horas, y luego se extraerán para observación. En este momento, la mayoría de las células se adhieren a la pared. si la célula todavía no puede adherirse a la pared, mida la vitalidad de la célula con la tinción azul de esperanza. si se confirma que la vitalidad de la célula es normal, centrifuga la célula y la cultive nuevamente con un medio fresco; Si los resultados de la tinción muestran que la célula es inactiva, tome una foto y Póngase en contacto con nosotros a tiempo. después de confirmar la información, le enviaremos de nuevo de forma gratuita.

4. después de que la célula se adhiera a la pared, vierta el medio de cultivo en el frasco celular y deje de 6 a 8 ML para mantener el cultivo normal de la célula, que se transmitirá normalmente cuando la confluencia celular de atcc CRL - 1711 (sf9) sea de alrededor del 80%.

5. se pide a los clientes que utilicen medios de cultivo en las mismas condiciones para el cultivo celular. El exceso de medio de cultivo en el frasco de cultivo se puede recoger para su uso posterior, y la célula se puede mezclar con el medio de cultivo propio del cliente en un cierto porcentaje al pasar, para que la célula se adapte gradualmente a las condiciones de cultivo.

6. se recomienda que los clientes tomen varias fotos de las células tres días antes de recibir las células para registrar el Estado de las células y facilitar la comunicación con el Departamento técnico. Debido al transporte, las células sensibles individuales experimentarán inestabilidad, por favor póngase en contacto con nosotros a tiempo para informarnos de la situación específica de las células, para que nuestros técnicos puedan rastrear la visita de regreso hasta que se resuelva el problema.

7. la célula es solo para uso científico.