5.637 células humanas de cáncer de vejiga

¡¡ los productos de la compañía son solo para investigación científica y no se pueden utilizar para diagnóstico clínico!

Línea / línea celular:

1. línea celular: línea celular formada por la línea de linaje celular que originalmente existía en el cultivo primario después de la transmisión exitosa.

2. línea celular: la obtención de propiedades o marcadores especiales de cultivos o líneas celulares primarias mediante el método de selección o el método de formación de clones se llama línea celular. Las propiedades especiales o marcadores de las líneas celulares deben estar presentes durante todo el cultivo. Si no se puede continuar la transmisión o el álgebra de transmisión es limitado, se llama línea celular limitada; Si se puede transmitir continuamente, se llama línea celular continua. Para las células tumorales humanas, las que se cultivan in vitro durante más de medio año, tienen un crecimiento estable y se transmiten continuamente se pueden llamar líneas o líneas continuas.

(1) formación de la primera generación

El cultivo primario, también conocido como cultivo primario, es el primer cultivo de células, tejidos y órganos extraídos directamente del cuerpo. Una vez que las células que han sido cultivadas de generación en generación (subculture), ya no se llaman cultivos primarios, sino líneas celulares.

(2) líneas celulares

Las células después de que el medio de primera generación comienza el primer cultivo de transmisión, es decir, se llaman líneas celulares. Si la supervivencia de la línea celular es limitada, se llama línea celular limitada; Las líneas celulares que han adquirido una capacidad de reproducción infinita para sobrevivir continuamente se llaman líneas celulares continuas o líneas celulares infinitas. La mayoría de las líneas celulares infinitas se han heteroploide, tienen cariotipos heteroploides y algunas pueden haberse convertido en células malignas, por lo que son esencialmente líneas celulares transformadas. Algunas líneas celulares infinitas solo son inmortales (o inmortales), pero todavía conservan la inhibición de la exposición y la carcinogenicidad de la vacunación sin variantes; Algunos no solo tienen inmortalidad, sino que también son oncogénicos en la vacunación alogénica, lo que indica que han sido malignos. Estas dos líneas celulares infinitas de diferentes propiedades a menudo no son muy estrictas en la aplicación de estos términos en la literatura nacional y extranjera. ¡¡ para la claridad conceptual, este libro utiliza líneas celulares infinitas con malignidad! ¡¡ líneas celulares transformadas malignas! La palabra ± puede ser más apropiada. Para aquellas líneas celulares que solo tienen inmortalidad y no son malignas, basta con usar líneas celulares infinitas o transformar líneas celulares. Los nih3t3, Rat - 1, 10t1 / 2 que circulan actualmente pertenecen a este tipo de líneas celulares.

Operación de cultivo celular:

1) células de reanimación: agitar y descongelar rápidamente el criodepósito que contiene 1 ml de suspensión celular en un baño de agua a 37 ° c, mezclar uniformemente con 4 ml de medio de cultivo. Centrifugar durante 3 minutos a 1000 rpm, descartar el sobrenadante y añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo para soplar bien. A continuación, todas las suspensiones celulares se añaden a un matraz que contiene un medio adecuado para el cultivo durante la noche (o las suspensiones celulares se añaden a una placa de Petri de 6 cm, se añaden unos 4 ml de medio para el cultivo durante la noche). Al día siguiente, cambie de líquido y compruebe la densidad celular.

2) transmisión celular: si la densidad celular alcanza el 80% - 90%, se puede realizar el cultivo de transmisión. a、 Abandone el sobrenadante de cultivo y lave las células 1 - 2 veces con PBS sin iones de calcio y magnesio.

b、 Añadir 1 ml de líquido digestivo (0,25% TRYPSIN - 0,53 mm edta) al matraz de cultivo para que el líquido digestivo se infiltre en todas las células, descartar el líquido digestivo, colocar el matraz de cultivo en una incubadora a 37 ° C para digerir 1 - 3 Min (dependiendo de la digestión celular), y luego observar la digestión celular bajo un microscopio, si La mayoría de los blastocitos se redondean y se caen, llevarlo rápidamente de vuelta a la Mesa de operaciones, golpear ligeramente el matraz de cultivo y añadir 2 - 3 ml de medio de cultivo para terminar la digestión. Después de mezclar suavemente, Póngalo en un tubo centrífuga estéril, centrifugarlo a 1000 RPM durante 5 minutos, descartar el sobrenadante, añadir 1 - 2 ml de medio de cultivo y soplarlo bien. .

c、 Dividir la suspensión celular en una nueva placa de Petri o botella que contenga 8 ml de medio de cultivo en una proporción de 1: 2 y cultivarla en una incubadora.

3) Criopreservación celular: cuando la célula está en buen estado de crecimiento, se puede congelar la célula. Tomemos como ejemplo las siguientes botellas t25;

a、 Recoger las células, cargarlas en un tubo centrífuga estéril, centrifugarlas durante 4 minutos a 1000 rpm, descartar el sobrenadante, lavarlas una vez con pbs, descartar todo el PBS y realizar el recuento celular.

b、 Agregue el liofilizado de células libres de suero de acuerdo con el número de células, haga que la densidad celular sea de 5 × 106 a 1 × 107 / ml, mezcle suavemente, congele 1 ml de suspensión celular en cada liofilizado, preste atención al liofilizado para hacer un buen trabajo de identificación.

c、 Coloque el tubo de almacenamiento congelado en el refrigerador a - 80 ° C y transfiera al llenado de nitrógeno líquido para su almacenamiento después de 24 horas. Registre la ubicación del congelador para recogerlo la próxima vez.

Productos que la compañía está vendiendo: