Las muestras del kit de Elisa se conservan enKit de Elisa¡Es muy importante en el experimento, a menudo hay operadores de Elisa que reflejan hemólisis, aglutinación incompleta, contaminación bacteriana y otros fenómenos durante la conservación de muestras. los técnicos de nuestra empresa hacen un resumen de los problemas comunes relacionados. a continuación, echemos un vistazo al contenido de hoy: ¡ tengo un truco maravilloso para hacer el método de caja de prueba de elisa!

I. conservación inadecuada de los especímenes

Especímenes demasiado conservados en el refrigerador, en sueroEl IgG puede agrupar polímeros sintéticos y la AFP puede formar dímeros, lo que puede causar un fondo demasiado profundo e incluso falsos positivos en la determinación indirecta de elisa; Los especímenes se colocan durante demasiado tiempo (por ejemplo, más de un día), y a veces la actividad inmune de los antígenos o anticuerpos se debilita, y también pueden aparecer falsos negativos. Para superar la interferencia anterior, las muestras de suero determinadas por Elisa deben ser recogidas frescas; Si no se puede determinar de inmediato, las muestras de suero detectadas dentro de los 5 días se pueden almacenar a 4 ° c, y las muestras de suero detectadas después de 1 semana deben congelarse a baja temperatura; Las muestras disueltas después de la criopreservación, concentradas localmente en proteínas, distribuidas de manera desigual, deben mezclarse completamente antes de medirse, pero deben mezclarse suavemente y no oscilar fuertemente.

II. Hemólisis de especímenes

La Hemólisis de los especímenes causada por diversas causas humanas puede liberar una gran cantidad de hemoglobina con actividad de peroxidasa cuando se disuelve debido a la destrucción de los glóbulos rojos, marcada por la peroxidasa de rábano picante.En la determinación de elisa, puede causar un color no específico, y el kit de Elisa interfiere con los resultados de la determinación. Para superar la interferencia anterior, se debe prestar atención a evitar la Hemólisis al recoger las muestras.

3. aglutinación incompleta de especímenes

Sin la presencia de coagulantes y anticoagulantes, después de la recolección normal de sangreDe 1 / 2 a 2 h comenzó a solidificarse y de 18 a 24 H. En el trabajo de pruebas clínicas, a veces, para ganar tiempo para una detección rápida, a menudo se centrifuga por la fuerza para separar el suero antes de que la sangre comience a solidificarse. en este momento, todavía queda parte del colágeno en el suero. durante el proceso de determinación elisa, se pueden formar bloques de fibroína visibles a simple vista, lo que puede causar fácilmente resultados falsos positivos. Este tipo de situaciones se volvieron negativas al día siguiente debido a la hemaglutinación, que ya no estaba presente en el suero, por lo que el resultado de la revisión se volvió negativo. Para evitar la interferencia anterior, la mejor solución es que las muestras de sangre deben ser completamente solidificadas después de la recolección antes de separar el suero, o los vasos sanguíneos con pegamento de separación deben ser recolectados o los vasos sanguíneos deben ser añadidos con un coagulante adecuado.

cuatro, los especímenes están contaminados por bacterias

Debido a que los hongos pueden contener peroxidasa endógena de rábano picante, los especímenes contaminados por bacterias, al igual que los especímenes hemolíticos, también pueden producir colores no específicos que interfieran con los resultados de la determinación.